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FUNDAMENTO
Fundamento teórico - científico:
La microbiología es la ciencia que estudia los organismos microscópicos en todos sus aspectos entre los que se encuentran su distribución, características y efectos. En general se citan seis tipos de microorganismos: bacterias, hongos, virus, algas, protozoos y rickettsias. Entre todos estos grupos los que cobran más interés dentro de la microbiología alimentaria son las bacterias, los hongos y los virus por este orden
La interacción entre microorganismos, plantas y anímeles son naturales y constantes, esta comprobado la importancia que tienen los microorganismos en los siclos geoquímicos naturales.
Puesto que los alimentos que consume el hombre provienen básicamente de plantas y animales y sus derivados, es comprensible que dichos alimentos contengan microorganismos interactuando en ellos, utilizando nuestros alimentos como fuente de nutrientes para su desarrollo; produciendo alteraciones en los mismos, las cuales “echan a perder” los alimentos.
Los microorganismos se multiplican, utilizan los nutrientes, producen modificaciones enzimáticos.
El PH es el logaritmo con cambio de signo de la concentración de iones hidrógeno. Este factor es decisivo en el crecimiento de los microorganismos. La mayoría muestran preferencia por PH entre 6,8-7,5. En cambio, las levaduras y mohos crecen bien a PH de 4 incluso inferior. Es por ello que en alimentos ácidos que están en rango de ph, severa un mayor crecimiento de hongos y levaduras y en los que estén un poco más cerca de la neutralidad será mayor la proliferación de bacterias.
Si adicionamos los microorganismos a un medio en el cual se incluyen todos los nutrientes necesarios para su crecimiento (los alimentos lo suelen contener) y lo sometemos a condiciones favorables, éstos se multiplican por fisión binaria.
Los alimentos son analizados microbiológicamente en el laboratorio para verificar su seguridad microbiológica. Normalmente, a la hora de realizar los análisis microbiológicos de un alimento determinado, se suele seguir la legislación vigente y en caso de que haya un vacío legal, se suele seguir lo indicado en las normas ISO.
Fundamento bíblico:
Y Jehová dijo a Moisés: He aquí yo os haré llover pan del cielo; y el pueblo saldrá, y recogerá diariamente la porción de un día, para que yo lo pruebe si anda en mi ley, o no. Mas en el sexto día prepararán para guardar el doble de lo que suelen recoger cada día. Exodo 16:4-5
Y cuando el rocío cesó de descender, he aquí sobre la faz del desierto una cosa menuda, redonda, menuda como una escarcha sobre la tierra. Y viéndolo los hijos de Israel, se dijeron unos a otros: ¿Qué es esto? porque no sabían qué era. Entonces Moisés les dijo: Es el pan que Jehová os da para comer. Esto es lo que Jehová ha mandado: Recoged de él cada uno según lo que pudiere comer; un gomer por cabeza, conforme al número de vuestras personas, tomaréis cada uno para los que están en su tienda. Y los hijos de Israel lo hicieron así; y recogieron unos más, otros menos; y lo medían por gomer, y no sobró al que había recogido mucho, ni faltó al que había recogido poco; cada uno recogió conforme a lo que había de comer. Y les dijo Moisés: Ninguno deje nada de ello para mañana. Mas ellos no obedecieron a Moisés, sino que algunos dejaron de ello para otro día, y crió gusanos, y hedió; y se enojó contra ellos Moisés. Y lo recogían cada mañana, cada uno según lo que había de comer; y luego que el sol calentaba, se derretía. En el sexto día recogieron doble porción de comida, dos gomeres para cada uno; y todos los príncipes de la congregación vinieron y se lo hicieron saber a Moisés. Y él les dijo: Esto es lo que ha dicho Jehová: Mañana es el santo día de reposo, el reposo consagrado a Jehová; lo que habéis de cocer, cocedlo hoy, y lo que habéis de cocinar, cocinadlo; y todo lo que os sobrare, guardadlo para mañana. Y ellos lo guardaron hasta la mañana, según lo que Moisés había mandado, y no se agusanó, ni hedió. Y dijo Moisés: Comedlo hoy, porque hoy es día de reposo para Jehová; hoy no hallaréis en el campo. Seis días lo recogeréis; mas el séptimo día es día de reposo; en él no se hallará. Y aconteció que algunos del pueblo salieron en el séptimo día a recoger, y no hallaron. Y Jehová dijo a Moisés: ¿Hasta cuándo no querréis guardar mis mandamientos y mis leyes? Mirad que Jehová os dió el día de reposo, y por eso en el sexto día os da pan para dos días. Estése, pues, cada uno en su lugar, y nadie salga de él en el séptimo día. Así el pueblo reposó el séptimo día. Exodo 16:14-30
Seis días trabajarás, y harás toda tu obra; mas el séptimo día es reposo para Jehová tu Dios; no hagas en él obra alguna, tú, ni tu hijo, ni tu hija, ni tu siervo, ni tu criada, ni tu bestia, ni tu extranjero que está dentro de tus puertas.
Porque en seis días hizo Jehová los cielos y la tierra, el mar, y todas las cosas que en ellos hay, y reposó en el séptimo día; por tanto, Jehová bendijo el día de reposo y lo santificó. Éxodo 20:9-11

24 pipetas serologicas de 10 ml
120 pipetas seroligicas de 1 ml
60 varillas en forma de L
24 frascos con tapón de rosca de 250 ml.
40 tubos de ensayo con tapón de rosca.
732 cajas de petri.
Autoclave.
Horno de secado y esterilización en seco.
Incubadora de bacterias.
Incubadora de hongos.
6 mecheros de bunsen.
1 Probeta de 500 y1000 ml
1 Balanza granataria.
Papel aluminio.
8 matraces de fondo plano de 500ml.
8 matraces de fondo plano de 1000 ml.
1 ph metro con electrodo.
24 vasos depresipitados de 150 ml
24 espátulas
Perilla o succionador.
3 tripie
3 mayas de asbesto.
1 par de guantes de asbesto.
Encendedor.
Calculadora.
Contador de colonias.
Picetas.
Agar dextrosa papa.
Agar métodos estándar.
Agar sal y manitol.
Agar bilis rojo violeta.
Solución búfer a ph de 7.0
Agua destilada suficiente.

PROCEDIMIENTO:
Se elaboran jugo de naranja y de zanahoria el martes 13, el miércoles 14, el viernes 16, el sábado 17, el viernes 23 y el sábado 24 de octubre del año 2009 en el sanatorio naturista Canoas, estos son llevados al laboratorio de microbiología de la escuela de Químico Clínico Biólogo dependiente de la Universidad de Montemorelos en el Municipio de Montemorelos N.L. Son etiquetados y preparados para su investigación microbiológica.
En el laboratorio se preparan los materiales y reactivos para la investigación microbiológica de estos según las normas oficiales, de cada uno de los parámetros a investigar.
Preparación de los medios de cultivos:
Se hicieron 4 tipos de estudios microbiológicos a cada una de las muestras (Sstaphylococcus aureu, hongos y levaduras, coliformes totales y mesofilos aerobios).
Se opto por el método mas apropiado de acuerdo a las comodidades del laboratorio y siguiendo los requisitos de las normas oficiales.
Para los Staphylococcus aureus. Se preparo el medio de cultivo sal y manitol,
Según la NOM-115-SSA1-1994
Para hongos y levaduras se prepara el agar dextrosa papa, y si se le agrego acido tartarico. Según NOM-111-SSA1-1994
Para coliformes totales se usa el agar bilis rojo violeta, según la NOM-113-SSA1-1994
Para mesofilos aerobios se usa el agar métodos estándar, según la NOM-092-SSA1-1994
Las diluciones de las muestras se hicieron bajo las normas que rige la norma oficial mexicana (NOM-110-SSA1-1994 Bienes y servicios. Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico.)
Momento de sembrado:
Una vez que ya tenemos listo todo lo anterior, procedemos al sembrado de las muestras, de acuerdo a los métodos ya mencionados y apegados a los reglamentos de las normas oficiales, las cuales están anexadas en este documento.

Una vez terminado los procedimientos y de que los medios se hayan solidificado se ponen en la incubadora de bacterias a 37ºC por 24 hrs, u hongos y levaduras 35ºC por 72 horas, según sea el caso.

Imagen 2: vaciado, extensión lista y medios solidificados. Muestras del sábado 17 octubre 2009

Para el calculo de pH se utilaza un phmetro con electro, se colocan 25 ml del jugo aproximadamente y en un vaso de precipitado de 150 ml y se le introduce el electro del phmetro, hasta que el equipo marque una ph constante.

Resultados
Jugo de naranja preparado y sembrado el martes 13 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	1,700 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	1,500 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 4,100 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	4.51	ph= potencial de hidrogeno

Jugo de zanahoria preparado y sembrado el martes 13 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	102,000 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	22,000 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 1,800 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.63

Jugo de naranja preparado el día 13 y sembrado el 14 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	> 250,000 ufc/ ml VE	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	>150,000 ufc / ml VE	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = 600 ufc/ml VE Levaduras = 6,400 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	Jugo de naranja = 4.61

Figura 5: agar métodos estándar, jugo de naranja, comparación de crecimiento de colonias entre el jugo preparado el viernes y sembrado el sábado y del preparado y sembrado, en la misma dilución.

Jugo de zanahoria preparado el día 13 y sembrado el 14 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	> 250,000 ufc/ ml VE	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	>150,000 ufc / ml VE	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 3,400 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	5.41

Jugo de naranja preparado y sembrado el miércoles 14 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	4,850 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	4,400 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 2,200 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	4.39

Jugo de zanahoria preparado y sembrado el 14 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	9,650 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	8,700 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 1,500 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.50

Jugo de naranja preparado y sembrado el viernes 16 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	3.050ufc/ ml	Ufc= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	1750 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = < 10 ufc/ml VE	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	4.35	ph= potencial de hidrogeno

Jugo de zanahoria preparado y sembrado el viernes 16 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	15,000 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	6,700 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = < 10 ufc/ml VE	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.37

Figura 6: agar bilis rojo violeta, jugo de naranja preparado el viernes y sembrado el viernes.

Jugo de naranja preparado el día 16 y sembrado el sábado 17 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	4,650 ufc/ ml VE	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	4,550 ufc / ml VE	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = < 10 ufc/ml VE	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	Jugo de naranja = 4.30

Jugo de zanahoria preparado el día 16 y sembrado el 17 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	10,500 ufc/ ml VE	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	9,700 ufc / ml VE	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = < 10 ufc/ml VE	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.54

Jugo de naranja preparado y sembrado el sábado 17 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 2,200 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	4.33

Jugo de zanahoria preparado y sembrado el 17 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	57,000 ufc/ ml	Ufc= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	26,500 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 1,600 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.12

Jugo de naranja preparado y sembrado el viernes 23 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	6,150 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	5,150 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 3,800 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	4.46	ph= potencial de hidrogeno

Jugo de zanahoria preparado y sembrado el viernes 23 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	7000ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	4,600 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 3,600 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.56

Jugo de naranja preparado el día 23 y sembrado el 24 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	4,300 ufc/ ml VE	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	2,200 ufc / ml VE	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = 200 ufc/ml VE Levaduras = < 10 ufc/ml VE	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	Jugo de naranja = 4.40

Figura 7: agar métodos estándar, jugo de naranja preparado el viernes y sembrado el sábado
asa

Figura 8: agar dextrosa papa, jugo de naranja preparado el viernes y sembrado el sábado.

Jugo de zanahoria preparado el día 23 y sembrado el 24 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	23,000 ufc/ ml VE	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	11,300 ufc / ml VE	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 1,100 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
Ph	6.66

Figura 9: agar métodos estándar, jugo de zanahoria preparado el viernes y sembrado el sábado

Jugo de naranja preparado y sembrado el sábado 24 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	7,600 ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	3,600 ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = 1,500 ufc/ml VE Levaduras = 2,300 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	4.41

Figura 10: agar métodos estándar, jugo de naranja preparado y sembrado el sábado.

Jugo de zanahoria preparado y sembrado el sábado 24 de octubre de 2009, resultado después de 24 horas de incubación.

Medio/ bacterias que se buscan.	Unidades formadoras de colonias por ml de muestra.
Métodos estándar / mesofilos aerobios.	56,000ufc/ ml	Ufm= unidades formadoras de colonias
Agar bilis rojo violeta/ coliformes totales	38,000ufc / ml	ml= mililitros
Agar dextrosa papa / hongos y levaduras	Hongos = < 10 ufc/ml VE Levaduras = 5,800 ufc/ ml	VE = valor estimado
Agar sal y manitol./ Staphylococcus aureuse	< 10 ufc/ml VE
ph	6.50

Imagen 12: crecimiento en el agar dextrosa papa del jugo de zanahoria preparado el día sábado y sembrado el día sábado.

Imagen 13: comparación del crecimiento de colonias en los jugos de zanahoria entre el dejado preparado el día viernes y el preparado el día sábado.

Figura 14: agar métodos estándar, jugo de zanahoria preparado y sembrado el sábado

Figura 15: agar verde rojo violeta, jugo de zanahoria preparado el viernes y sembrado el sábado

Figura 16: agar verde rojo violeta, jugo de zanahoria preparad y sembrado el sábado